標準編號:	GB/T 15550-1995
中文名稱:	活化乳中乳過氧化物酶體系保存生鮮牛乳實施規范
英文名稱:	Code of practice for the preservation of raw and fresh milk by activating the lactoperoxidase system
中標分類:	X16    乳與乳制品
行業分類:	GB    國家標準
ICS分類:	67.100.01 67.100.01    奶和奶制品綜合 67.100.01
發布機構:	國家技術監督局
發布日期:	1995-04-19
實施日期:	1995-1-2
標準狀態:	abolished
作廢日期:	2005-10-14
翻譯語言:	英文
文件格式:	PDF
中文字符數:	7000 字
翻譯價格(元):	1200.0
交付時間:	付款后 1 個工作日

Codeofchina.com is in charge of this English translation. In case of any doubt about the English translation, the Chinese original shall be considered authoritative. Contents 1 Subject content and applicable scope 1 2 Normative references 1 3 Terms 1 4 Method principle 2 5 Preparation of preservative 2 6 Operation method 4 7 Use requirements 4 8 Use control 5 Annex A Specification standard of sodium percarbonate (Supplementary) 6 Annex B Analysis of thiocyanate (SCN-) in milk (Supplementary) 8 Additional explanation: 9 Code of practice for the preservation of raw and fresh milk by activating the lactoperoxidase system 1 Subject content and applicable scope This standard specifies the method for preventing bacterial spoilage of raw and fresh milk (including buffalo milk, the same below) by lactoperoxidase system during storage, collection and transportation to dairy processing plants after extrusion. This standard is applicable to the technical requirements for the preservation of raw and fresh milk from putrefaction and deterioration by lactoperoxidase system. 2 Normative references GB 268 Chemical reagent - Sodiumthiocyanate GB 2760 Hygienic standards for uses of food additives GB 6684 Chemical regents - 30% Hydrogenperoxide GB 6914 Standards for the qualifications of raw and fresh milk received from farms 3 Terms 3.1 lactoperoxidase iron-containing whey protein, code-named LP, found in milk's whey, which accounts for 1% of whey protein. The content of LP in milk is about 10~30 ug/mL, with the characteristics of relative stability to heat. Ordinary pasteurization (62℃ for 30 min or 72℃ for 15 s) cannot make it lose its vitality, but it can be destroyed at 80℃ for 2.5 s 3.2 lactoperoxidase system antibacterial system composed of lactoperoxidase, thiocyanate and hydrogen peroxide, code-named LPS, naturally found in raw and fresh milk (including buffalo milk) and human saliva 3.3 hydrogen peroxide strong oxidant, with the molecular formula of H2O2; the specific gravity of 100% hydrogen peroxide at 18℃ is 1.4465 3.4 sodium percarbonate a dry, white, crystalline fine powder compound which is extremely soluble in water and can slowly release hydrogen peroxide in water, thus it is a strong oxidant. At present, it has been used as the main ingredient of milk preservative abroad, with the molecular formula 2Na2CO3·3H2O2 3.5 thiocyanate anion with the molecular formula of SCN- or CNS- which presented in all tissues and secretions of animals. The SCN- content in milk is 2~7 (1~15) ppm. With weak toxicity and accumulation toxicity, when used as milk preservative, SCN- must be strictly used in accordance with the Code, and be not abused 4 Method principle The concentration of lactoperoxidase in raw and fresh milk is quite high, which is enough to meet the need of LPS formation and antibiosis (0.5μg/mL). In the presence of H2O2, SCN- is promoted to be oxidized into thiocyanate (HOSCN). When the milk has a pH of 6.4~6.8, thiocyanate will be separated, and OSCN- is the main existence form. This ion is specially combined with the free hydrogen sulfide (SH) on the surface of bacterial cells, which results in the inactivation of several enzymes related to life metabolism of bacteria and hinders the metabolism and proliferation of bacteria. This antibacterial thiocyanate oxide is unstable at neutral pH and is easily decomposed into thiocyanate spontaneously. The speed of decomposition reaction depends on temperature, the higher temperature, the faster decomposition. Pasteurization of milk can ensure that the residue of this active oxidation product is completely removed. The oxidation degree of thiocyanate is very low when the milk just leaves the breast, but by adding hydrogen peroxide with low concentration, the oxidation can be promoted. When raw milk is stored by H2O2 with high concentration (300~800 ppm), lactoperoxidase in the milk is destroyed, oxidation of thiocyanate is prevented, and the H2O2 is used for antibiosis. SCN- combines with H4O2 in equimolar form. If the concentration of HO2 is low, some SCN- cannot be oxidized, OSCN- yield decreases, and the fresh-keeping effect correspondingly weakens. If the concentration of H2O2 is high, higher oxyacid with a shorter existence time than OSCN- is produced, such as cyanosulfurous acid (HO2SCN) and cyanosulfuric acid (HO3SCN), which are decomposed into O2SCN- and O3SCN- respectively in milk. Although its bactericidal power is stronger than OSCN-, it is extremely unstable and its existence time is too short, so its fresh-keeping effect is still weakened. When H2O2 is equimolar, the antibacterial effect of LPS is positively correlated with SCN- concentration within a certain limit. When this method is used to keep fresh, SCN- needs to be added to ensure that the SCN- level in milk reaches the required antibacterial effect. 5 Preparation of preservative 5.1 The preservative is composed of sodium thiocyanate and hydrogen peroxide or sodium percarbonate which shall be not lower than the analytical purity grade in GB 2168 and GB 6684 respectively. Because no national standard is available to apply, sodium percarbonate is temporarily not lower than the Specification standard of sodium percarbonate (Annex A) formulated by the 35th session of the United Nations JECFA1). Note: 1) JECFA is the Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives. 5.2 Preservatives are divided into solid and liquid depending on their forms, with the same preservation effect. 5.2.1 The solid preservatives consist of sodium thiocyanate and sodium percarbonate. 5.2.1.1 Addition of sodium thiocyanate: 15 mg per kg of raw and fresh milk. 5.2.1.2 Addition of sodium percarbonate: 30.8 mg per kg of fresh milk when the purity is 85%. 5.2.1.3 Package: The above two drugs must be separated, packaged separately with food-grade translucent plastic film, and sealed in vacuum; or lactose and other appropriate amount of filler are added into tablets, and sealed with blister plastic film to prevent moisture. The name and weight of the drug are indicated on the package. 5.2.2 The liquid preservatives consist of sodium thiocyanate solution and hydrogen peroxide solution. 5.2.2.1 Preparation of sodium thiocyanate solution: weigh 15.0 g of sodium thiocyanate into a 100mL volumetric flask, add 50 mL of distilled water, shake well, add distilled water to the mark of the volumetric flask after dissolution, then subpackage the solution into nontoxic plastic bottles or glass bottles, and seal. The name and concentration of the drug (15g/100mL) are indicated on the solution bottle. 5.2.2.2 Preparation of hydrogen peroxide solution: Pipette 19.6 mL of 30% hydrogen peroxide solution into a 100mL volumetric flask and add distilled water to the mark, then dispense the solution into non-toxic plastic bottles or brown glass bottles, and seal. The name and concentration of the drug (8.5g/100mL) are indicated on the solution bottle. 5.2.2.3 Instructions must be attached when packing the above two kinds of solutions. The commodity name, the factory name, the sealing date, the effective period, and the precautions during storage and transportation (such as moisture proof, pressure proof, etc.) must be printed on the box.

1 Subject content and applicable scope 2 Normative references 3 Terms 4 Method principle 5 Preparation of preservative 6 Operation method 7 Use requirements 8 Use control Annex A Specification standard of sodium percarbonate (Supplementary) Annex B Analysis of thiocyanate (SCN-) in milk (Supplementary) Additional explanation:

GB/T 15550-95 中華人民共和國國家標準 活化乳中乳過氧化物酶體系保存 生鮮牛乳實施規范 Code of practice for the preservation of raw and fresh milk by activating the lactoperoxidase system 1主要內容與適用范圍 本標準規定了生鮮牛奶（包括水牛奶，下同）擠下后，在貯存、搜集和運輸到乳品加工廠期間利用乳過氧化物酶體系防止其細菌性腐壞的方法。 本標準適用于利用乳過氧化物酶體系保存生鮮牛奶防止牛奶腐壞變質的技術要求。 2引用標準 GB1268 化學試劑 硫氰酸鈉 GB2760 食品添加劑使用衛生標準 GB6684 化學試劑 30%過氧化氫 GB6914 生鮮牛乳收購標準 3術語 3.1乳過氧化物酶（lactoperoxidase） 代號為LP，存在于牛奶的乳清中，含鐵的乳清蛋白質，約為乳清蛋白質的1%。牛奶中LP約為10~30ug/mL。LP的特性是對熱比較穩定。普通巴氏殺菌法（62℃30min或72℃15s）不能使其喪失活力，但80℃2.5s即可使其破壞。 3.2乳過氧化物酶體系（lactoperoxidase system） 代號為LPS，天然存在于生鮮牛奶（包括水牛奶）中和人類唾液中，為乳過氧化物酶、硫氰酸鹽與過氯化氫三種物質所組成的一種抗菌體系。 3.3過氧化氫（hydrogen peroxide） 化學分子式為H2O2，為一種強氧化劑。100%濃度的過氧化氫18℃時比重為1.4465。 3.4過碳酸鈉（sodium percarbonate） 為干燥、白色、結晶細粉末狀化合物，極易溶于水，在水中可以緩慢地放出過氧化氫，因而它是一種強氧化劑。目前國外已用它做牛奶保鮮劑的主要成分，分子式為2Na2CO3·3H2O2。 3.5硫氰酸鹽（thiocyanate） 化學分子式為SCN-，也可寫成CNS-，為動物所有組織和分泌物中存在的陰離子。牛奶中SCN-含量為2~7（1~15）ppm。SCN-具有微弱的毒性和蓄積毒性，用作牛奶保鮮劑時，必須嚴格遵照本實施規范執行，嚴禁濫用。 4方法原理 乳過氧化物酶在生鮮牛奶中的濃度相當高，足夠滿足其形成LPS達到抗菌的需要（0.5μg/mL）。 在有H2O2的條件下，促使SCN-被氧化成為亞硫氰酸（HOSCN）。在牛奶的pH值（pH6.4~6.8）條件下，亞硫氰酸會分離，以亞硫氰酸根離子（OSCN-）為主要存在形式。這種離子專門和細菌細胞表面游離的硫氫基團（SH）化合，致使細菌的幾種與生命代謝有關的酶喪失活力，阻礙了細菌的代謝和增殖的能力。 這種抗菌的硫氰酸鹽氧化物在中性pH值條件下不穩定，容易自發地分解為硫氰酸鹽。分解反應的速度決定于溫度，溫度較高時分解較快。奶的巴氏消毒可以保證這種活性氧化產物的殘余完全除凈。 乳汁剛離乳房時，硫氰酸鹽的氧化程度很小，但通過添加低微濃度的過氧化氫；可以促進這種氧化。使用高濃度（300~800ppm）H2O2保存生牛奶時，會毀壞奶中的乳過氧化物酶，阻止硫氰酸鹽的氧化，利用H2O2本身的殺菌作用抗菌。 SCN-與H4O2化合，以等摩爾化合。如HO2濃度較低，則有部分SCN-得不到氧化，OSCN-產量減少，保鮮的效力也相應地減弱；如H2O2濃度較大，則會產生存在時間比OSCN-更為短暫的較高的含氧酸，如氰亞硫酸（HO2SCN）和氰硫酸（HO3SCN），在奶中分別分解為O2SCN-和O3SCN-。其殺菌力雖較OSCN-為強，但極不穩定，存在時間太短，所以保鮮的效力仍然減弱。 當提供的H2O2為等摩爾時，LPS的抗菌作用在一定限度內和SCN-濃度呈正相關。應用此法保鮮時，需要添加SCN-以保證奶內具有的SCN-水平達到所需求的抗菌作用。 5保鮮劑的制備 5.1保鮮劑為硫氰酸鈉和過氧化氫或過碳酸鈉組成，硫氰酸鈉和過氧化氫須分別不低于GB 2168和GB 6684中分析純等級。過碳酸鈉因缺少國家標準，暫時規定不得低于聯合國JECFA1)第35屆會議制訂的《過碳酸鈉規格標準》（附錄A）。 注：1）JECFA為聯合國糧農組織/世界衛生組織聯合食品添加劑專家委員會。 5.2保鮮劑按形態分固態和液態兩種，具有同等保鮮效果。 5.2.1固態保鮮劑由硫氰酸鈉和過碳酸鈉組成。 5.2.1.1硫氰酸鈉添加量：每kg生鮮牛奶加入量15mg。 5.2.1.2過碳酸鈉添加量：純度為85%時，每千克生鮮牛奶加入量30.8mg。 5.2.1.3包裝：上述兩種藥劑必須分開，用食品級半透明塑料膜分別包裝，真空封口；或加乳糖等適量的填充劑壓成片劑，用水泡眼塑料膜封裝防潮。注明藥劑名稱和重量。 5.2.2液態保鮮劑由硫氰酸鈉溶液和過氧化氫溶液組成。 5.2.2.1硫氰酸鈉溶液配制：稱取15.0g硫氰酸鈉倒入100mL定容瓶內，加蒸餾水50mL.搖蕩，待溶解后再加蒸餾水至定容瓶刻度處，然后將溶液分裝無毒塑料瓶或玻璃瓶內，封口。瓶上注明藥劑名稱和濃度（15g/100mL）。 5.2.2.2過氧化氫溶液配制：用移液管吸取30%過氧化氫溶液19.6mL，移入100mL定容瓶內加蒸餾水至刻度處，然后將溶液分裝無毒塑料瓶或茶色玻璃瓶內，封口。瓶上注明藥劑名稱和濃度（8.5g/100mL）。 5.2.2.3以上兩種溶液裝箱時必須附使用說明，箱上印商品名稱、廠名、封箱日期、有效期限、貯存運輸時應注意事項（如防潮、防壓等）。 5.3液態或固態保鮮劑均應貯藏于陰暗、低溫處（3~5C為宜）。液態保鮮劑須經常用新配制的溶液對照檢查其保存牛奶的效力，效力下降時應及時更換。 5.4液態保鮮劑中過氧化氨溶液易分解，在3~5C冰箱中保存期不應超過兩個月，30℃以下室溫中不宜超過兩周。硫氰酸鈉溶液在3~5℃冰箱中貯藏4個月或室溫中貯藏3個月都不會影響保鮮效果。固態保鮮劑中硫氰酸鈉太易潮解，加工片劑時應注意工藝問題。用膠囊分裝的硫氫酸鈉離開密封袋后，室溫內貯存期不宜超過3個月。 6操作方法 6.1在奶中加入硫氰酸鈉，固態、液態均可，但只能用一種，不可二者同時都用。加入劑量：如固態，則依照5.2.1.1項規定辦理；如液態則用5.2.2.1項配制的硫氰酸鈉溶液每10kg奶中加1.0mL。然后用潔凈的攪拌器攪拌約1min，使其混合均勻。 6.2在奶中加入過碳酸鈉或過氧化氫，兩者之中同樣也只能加一種。加入劑量：加過碳酸鈉須依照5.2.1.2項規定辦理；加過氧化氫則用5.2.2.2項配制的過氧化氫溶液每10kg奶中加1.0mL。再攪拌2~3min，使其完全溶解并均勻分布于生鮮奶中。 6.3硫氰酸鈉和過碳酸鈉（或過氧化氫）添加時必須依照上述先后次序分別進行，不可顛倒，也不可以先混合，后加入或同時加入。 6.4添加保鮮劑應在奶擠出后2或3h之內進行。 7使用的規定 7.1牛奶收購中心（站）、點或奶牛場因無冷卻設施，或其他原因，必須用本方法處理生鮮牛奶，否則奶即會腐壞時才使用。 7.2本方法不能讓個體農民、牧民自己操作，只能在收奶中心、收奶點和國營農牧場使用。操作人員必須經過培訓，考試及格者方能上崗。使用本辦法處理過的生鮮牛奶在向乳品加工廠交售時必須進行說明。 7.3乳品廠加工搜集來的經過LPS方法處理的生鮮牛奶，應按照本方法的規定使用。乳品廠應建立有適當的控制方法（詳見8章），以監督檢查本方法的應用。 7.4本方法抑菌的效果決定于奶的貯存溫度。衛生等級好的生奶在不同的貯存溫度條件下，用LPS方法保鮮的有效時間見表1： 貯存溫度。℃ 有效保鮮時間 30 7～8h 25 11~12h 20 16~17h 15 24~26h 10 48h左右 3~5 5~7晝夜 7.5應用LPS方法保存的生鮮牛奶，飲用和加工前必須經過加熱消毒。 7.6應用LPS方法保存生鮮牛奶單位須不排除應用正常的預防措施和管理常規以保證生鮮牛奶的良好質量及衛生標準。 8使用的控制 8.1在采用LPS保存生鮮牛奶方法實施地區，乳品廠收奶時必須進行控制檢測。如酸度滴定，美蘭測定，活菌總數測定和SCN-濃度測定等。 8.2因SCN-在反應中沒有消耗，用LPS方法處理的奶送達乳品廠時，SCN-濃度應為10.74ppm+奶中天然SCN-濃度（后者可以測定當地未處理的鮮奶求得）。 8.3應不定期地隨機采取奶樣測定SCN-濃度。測值超出規定范圈，必須查明原因，情節嚴重者應拒絕收奶。 8.4保鮮劑藥品應由乳品廠統一定購和分發，并負責監督檢查。 附錄A 過碳酸鈉技術規格要求 （補充件） 我國尚無這種化學試劑的國家標準。參考聯合國JECFA·第35屆會議制訂的《過碳酸鈉規格標準》 要求如下： A1別名：碳酸鈉過氧水化物，過氧碳酸鈉。 A2定義：化學名稱 過碳酸鈉 C.A.S編號： 15630-89-4 化學式： 2Na2CO3·3HaO2 相對分子質量： 314.0 分析純度： 有效氧不少于13%（相當純度85%） A3說明：干燥、白色、結晶細粉末狀。 注意：為強力氧化劑，應避免接觸眼睛和皮膚。 A4功能和用途：抗微生物增效劑（乳過氧化物酶/硫氰酸鹽/過氧化物抗微生物的生奶保鮮體系的組成部分）。 A5特性： A5.1鑒定測試： 溶解度：易溶于水（商業品溶液不清澈） 鹼度：pH為10.5左右（1%溶液） 鈉的檢測：陽性通過 A5.2純度測試： 砷：不超過3mg/kg 重金屬：不超過10mg/kg（如Pb） A6分析方法： A6.1程序： 用量簡仔細加100mL硫酸溶液[c(H2SO3)=1.8mol/L]于600mL燒杯中，用稱樣皿（tared watchglass）準確地稱取大約4g樣品。設此樣品重量為mg。將稱樣皿放入燒杯中，燒杯上蓋一表玻璃（clockglass），搖勻，使樣品溶解。將溶液移入一500mL容量瓶中，用蒸餾水沖洗表玻璃和燒杯壁，并將沖洗液全部倒入容量瓶中，再用蒸餾水稀釋至刻度處，充分混合。 取100mL硫酸溶液[c(H2SO3)=1.8mol/L]加入一600mL錐形燒瓶中，并加高錳酸鉀溶液[c( KMnO4)=0.1 mol/L]滴定至呈現暗淡持久粉紅色。用安全移液管加入25.0mL樣品溶液并充分混合。用高錳酸鉀溶液[c( KMnO4)=0.1 mol/L]滴定至再呈現暗淡持久粉紅色。設滴定結果為VmL。 A6.2計算 樣品中有效氧的含量計算如式（A1）： 有效氧(如O2)% （A1） 式中： c——高錳酸鉀溶液之物質的量濃度，mol/L； m——樣品重量，g； V——高錳酸鉀溶液之用量，mL。 附錄B 奶中硫氰酸鹽（SCN-）的分析 （補充件） B1原理：奶經過分離脫脂，加入三氯乙酸（TCA）脫蛋白后，再加入高鐵復合物，在460nm波長下，測定吸光度，可測出其中SCN-含量，可測定出最小的濃度為1~2ppm。 B2試劑溶液 B2.120%（m/V）三氯乙酸（TCA）溶液：用20gTCA（分析純）溶于100mL蒸餾水中，過濾即得。 B2.2硝酸鐵試劑：取16.0克硝酸鐵（Fe（NO3）3·9H2O]（分析純）溶解于50mL硝酸溶液[c（HNO3） =2mol/L]1)中，用蒸餾水稀釋至100mL。配好的溶液應貯存于黑暗冷涼地方。 注：1）硝酸溶液[c(HNO3)=2mol/L]之配制法：取138.5毫升65%HNO3（分析純）用蒸餾水稀釋成1000 mL。 B3測定：取4mL奶離心脫脂后加入2.0mL20%TCA溶液，混合均勻后，靜置（最好在3~5℃冰箱內）不少于30分鐘，然后過濾。取清澈的濾液1.5mL加入1.5mL硝酸鐵試劑，混合后，在460nm波長下測定吸光度；同時用1.5mL硝酸鐵試劑加蒸餾水1.5mL混合均勻后做空白對照。測定必須在加入硝酸鐵試劑后10min之內進行。因為顏色復合物不穩定，稍久即變。將所得結果與5~6個已知的不同濃度（如5、10、15、20和30ppm）的SCN-溶液用同樣處理所得結果（標準）相比，即可求出奶中SCN-的濃度。 附加說明： 本規范由中華人民共和國農業部提出。 本規范由中國農業科學院畜牧研究所起草。 本規范主要起草人王鵬。 本標準參照采用聯合國食品法典委員會（CAC）批準的國際奶聯（IDF）制訂的《利用乳過氧化物酶體系保存生奶實施規范》和糧農組織/世界衛生組織聯合食品添加劑專家委員會（JECFA）第35屆會議（1989）制訂的C.A.S15630-89《過碳酸鈉規格標準》。