標準編號:	GB/T 5750.12-2023
中文名稱:	生活飲用水標準檢驗方法 第12部分：微生物指標
英文名稱:	Standard examination methods for drinking water—Part 12: Microbiological indices
中標分類:	C51    環境衛生
行業分類:	GB    國家標準
ICS分類:	13.060 13.060     13.060
發布機構:	國家市場監督管理總局 國家標準化管理委員會
發布日期:	2023-03-17
實施日期:	2023-10-1
標準狀態:	valid
替代舊標準:	GB/T 5750.12-2006 生活飲用水標準檢驗方法 微生物指標
翻譯語言:	英文
文件格式:	PDF
中文字符數:	60000 字
翻譯價格(元):	4200.0
交付時間:	付款后 1 個工作日

Foreword This document is developed in accordance with the rules given in GB/T 1.1-2020 Directives for standardization - Part 1: Rules for the structure and drafting of standardizing documents. This document is Part 12 of GB/T 5750 Standard examination methods for drinking water. The following parts of GB/T 5750 have been issued: ——Part 1: General principles; ——Part 2: Collection and preservation of water samples; ——Part 3: Water analysis quality control; ——Part 4: Organoleptic and physical indices; ——Part 5: Inorganic nonmetallic indices; ——Part 6: Metal and metalloid indices; ——Part 7: Aggregate organic indices; ——Part 8: Organic indices; ——Part 9: Pesticides indices; ——Part 10: Disinfection by-products indices; ——Part 11: Disinfectants indices; ——Part 12: Microbiological indices; ——Part 13: Radiological indices. Standard examination methods for drinking water - Part 12: Microbiological indices 1 Scope This document describes the methods for determination of standard plate-count bacteria, total coliforms, thermotolerant coliform bacteria, Escherichia coli, Giardia, Cryptosporidium, Enterococcus and Clostridium perfringens in drinking water and source water. This document is applicable to the determination of microbiological indices in drinking water and source water. 2 Normative references The following documents contain requirements which, through reference in this text, constitute provisions of this document. For dated references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies. GB 4789.28 National food safety standard - Food microbiological examination - Quality requirements for medium and reagents GB/T 6682 Water for analytical laboratory use - Specification and test methods GB 19489 Laboratories - General requirements for biosafety 3 Terms and definitions For the purposes of this document, the following terms and definitions apply. 3.1 standard plate-count bacteria number of microbial colonies in 1 mL of water sample after incubation for a certain period of time under certain conditions 3.2 total coliforms group of aerobic or facultative anaerobic, non-spore-forming, Gram-negative bacillus capable of fermenting lactose, producing acid and gas within 24 h of incubation at 37°C 3.3 thermotolerant coliform bacteria group of aerobic or facultative anaerobic, non-spore-forming, Gram-negative bacillus capable of fermenting lactose, producing acid and gas within 24 h of incubation at 44.5°C 3.4 Escherichia coli group of non-spore-forming, Gram-negative brevibacterium capable of fermenting various sugars, producing acid and gas, with flagella distributed over the entire surface and motile, which is usually found in the intestines and feces of humans and warm-blooded animals 3.5 Giardia protozoan parasite found in water or other media, which can infect humans and cause diseases Note: Giardia cysts are elliptical, with a length of 8–14 μm and a width of 7–10 μm. There are two nuclei in initial cysts, and four in mature cysts. 3.6 Cryptosporidium protozoan parasite found in water or other media, which can infect humans and cause diseases Note: Cryptosporidium oocysts are slightly elliptical and round, with a diameter of 4–8 μm. There are four nuclei in mature oocysts. 3.7 Enterococcus type of facultative anaerobic non-spore and non-capsule-forming Gram-positive cocci in pairs or in chains, belonging to Group D Streptococci, typically present in the intestines and feces of humans and warm-blooded animals 3.8 Clostridium perfringens type of anaerobic spore-forming Gram-positive bacilli capable of reducing sulfite, typically present in the intestines and feces of humans and warm-blooded animals 3.9 most probable number; MPN number of target microorganisms present in a certain volume of samples, i.e., the most probable number of target microorganisms per unit volume, estimated based on the number of positive target microorganisms produced by incubation of a certain volume of samples with different degrees of dilution, using the principle of statistics and according to the Poisson distribution 4 Standard plate-count bacteria 4.1 Petri dish counting method 4.1.1 Principle After culturing 1 mL of water sample on nutrient agar medium at 36±1°C under aerobic conditions for 48 h, the standard plate-count bacteria in 1 mL of water sample can be determined. 4.1.2 Nutrient agar medium 4.1.2.1 Composition It can be prepared according to the following composition: a) Peptone 10.0 g b) Beef extract 3.0 g c) Sodium chloride 5.0 g d) Agar 10.0–20.0 g e) Pure water 1,000 mL 4.1.2.2 Preparation method Mix the above ingredients, heat to dissolve, adjust the pH to 7.4–7.6, dispense into glass containers, autoclave at 121°C for 20 min , and store the solutions at 0–4°C. 4.1.3 Instruments and apparatus 4.1.3.1 Autoclave sterilizer. 4.1.3.2 Incubator: 36±1°C. 4.1.3.3 Electric furnace. 4.1.3.4 Electronic balance.

Foreword I Introduction III 1 Scope 2 Normative references 3 Terms and definitions 4 Standard plate-count bacteria 5 Total coliforms 6 Thermotolerant coliform bacteria 7 Escherichia coli 8 Giardia 9 Cryptosporidium 10 Enterococcus 11 Clostridium perfringens

前言 本文件按照GB/T 1.1—2020 《標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定 起草。 本文件是GB/T 5750《生活飲用水標準檢驗方法》的第12部分。 GB/T 5750 已經發布了以下 部分： ——第1部分：總則 ——第2部分：水樣的采集與保存； ——第3部分：水質分析質量控制； ——第4部分：感官性狀和物理指標； ——第5部分：無機非金屬指標； ——第6部分：金屬和類金屬指標； ——第7部分：有機物綜合指標； ——第8部分：有機物指標； ——第9部分：農藥指標； ——第10部分：消毒副產物指標； ——第11部分：消毒劑指標； ——第12部分：微生物指標； ——第13部分：放射性指標。 本文件代替GB/T 5750.12—2006《生活飲用水標準檢驗方法 微生物指標》,與GB/T 5750.12- 2006相比，除結構調整和編輯性改動外，主要技術變化如下： a) 增加了6個檢驗方法(見4.2、8.2、9.2、10.1、10.2、11.1)。 請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發布機構不承擔識別專利的責任。 本文件由中華人民共和國國家衛生健康委員會提出并歸口。 本文件及其所代替文件的歷次版本發布情況為： ——1985年首次發布為GB/T 5750—1985,2006年第一次修訂為GB/T 5750.12—2006; ——本次為第二次修訂。 引言 GB/T 5750《生活飲用水標準檢驗方法》作為生活飲用水檢驗技術的推薦性國家標準，與GB 5749 《生活飲用水衛生標準》配套，是GB 5749的重要技術支撐，為貫徹實施 GB 5749、開展生活飲用水衛生 安全性評價提供檢驗方法。 GB/T 5750由13個部分構成。 ——第1部分；總則。目的在于提供水質檢驗的基本原則和要求。 ——第2部分；水樣的采集與保存。目的在于提供水樣采集、保存、管理、運輸和采樣質量控制的基 本原則、措施和要求。 ——第3部分：水質分析質量控制。目的在于提供水質檢驗檢測實驗室質量控制要求與方法。 ——第4部分：感官性狀和物理指標。目的在于提供感官性狀和物理指標的相應檢驗方法。 ——第5部分：無機非金屬指標。目的在于提供無機非金屬指標的相應檢驗方法， ——第6部分：金屬和類金屬指標。目的在于提供金屬和類金屬指標的相應檢驗方法。 ——第7部分；有機物綜合指標。目的在于提供有機物綜合指標的相應檢驗方法。 ——第8部分；有機物指標。目的在于提供有機物指標的相應檢驗方法。 ——第9部分：農藥指標。目的在于提供農藥指標的相應檢驗方法。 ——第10部分：消毒副產物指標。目的在于提供消毒副產物指標的相應檢驗方法， ——第11部分：消毒劑指標。目的在于提供消毒劑指標的相應檢驗方法。 ——第12部分：微生物指標。目的在于提供微生物指標的相應檢驗方法， ——第13部分：放射性指標。目的在于提供放射性指標的相應檢驗方法， 生活飲用水標準檢驗方法 第12部分：微生物指標 1 范圍 本文件描述了生活飲用水和水源水中菌落總數、總大腸菌群、耐熱大腸菌群、大腸埃希氏菌、賈第鞭 毛蟲、隱孢子蟲、腸球菌和產氣莢膜梭狀芽孢桿菌的測定方法。 本文件適用于生活飲用水和水源水中微生物指標的測定。 2 規范性引用文件 下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文 件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于 本文件。 GB 4789.28 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 培養基和試劑的質量要求 GB/T 6682 分析實驗室用水規格和試驗方法 GB 19489 實驗室 生物安全通用要求 3 術語和定義 下列術語和定義適用于本文件。 3.1 菌落總數 standard plate-count bacteria 在一定條件下，經一定時間培養后所得1mL 水樣中的微生物菌落個數。 3.2 總大腸菌群 total coliforms 一群在37℃培養，24 h 內能發酵乳糖、產酸產氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。 3.3 耐熱大腸菌群 thermotolerant coliform bacteria 一群在44.5℃培養，24h 內能發酵乳糖、產酸產氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。 3.4 大腸埃希氏菌 Escherichia coli 一群能發酵多種糖類、產酸產氣、周身鞭毛、能運動、無芽孢的革蘭氏陰性短桿菌，通常存在于人和 溫血動物的腸道以及糞便中。 3.5 賈第鞭毛蟲 Giardia 一種可在水中或其他介質中發現的原蟲類寄生蟲，可感染人類致病。 注：賈第鞭毛蟲孢囊呈橢圓形，長度為8μm～14μm,寬度為7μm～10μm,孢囊形成初期內部有2個細胞核，成熟 后增加至4個細胞核。 3.6 隱孢子蟲 Cryptosporidium 一種可在水中或其他介質中發現的原蟲類寄生蟲，可感染人類致病。 注：隱孢子蟲卵囊為稍微橢圓的圓形，直徑4μm～8μm,成熟卵囊內部有4個細胞核。 3.7 腸球菌 Enterococcus 一類成雙或呈鏈狀排列、兼性厭氧、無芽孢和莢膜的革蘭氏陽性球菌，屬D 族鏈球菌，通常存在于 人和溫血動物的腸道以及糞便中。 3.8 產氣英膜梭狀芽孢桿菌 Clostridium perfringens 一類能還原亞硫酸鹽，具有芽孢的革蘭氏陽性厭氧桿菌，通常存在于人和溫血動物的腸道以及糞便中。 3.9 最可能數 most probable number;MPN 基于泊松分布，利用統計學原理，根據一定體積不同稀釋度樣品經培養后產生的目標微生物陽性 數，估算一定體積樣品中目標微生物存在的數量，即單位體積存在目標微生物的最大可能數。 4 菌落總數 4.1 平皿計數法 4.1.1 原理 1mL 水樣在營養瓊脂培養基上、在有氧條件下36℃±1℃培養48h 后，所得1mL 水樣中的菌落 總數的方法。 4.1.2 營養瓊脂培養基 4.1.2.1 成分 按如下成分配制 a) 蛋白胨 10.0 g b) 牛肉膏 3.0g c) 氯化鈉 5.0 g d) 瓊脂 10.0 g～20.0 g e) 純水 1000 mL 4.1.2.2 制法 將上述成分混合后，加熱溶解，調整pH 為7.4～7.6,分裝于玻璃容器中，經121℃高壓蒸汽滅菌20min,0℃~4℃冷藏保存。